在将杂交瘤细胞进行扩大培养前需要经过什么过程(杂交瘤细胞)
在将杂交瘤细胞进行扩大培养前需要经过什么过程(杂交瘤细胞)
1、为了得到完全同质的单克隆抗体，必须对杂交瘤细胞进行克隆化。另一方面，杂交瘤细胞培养的初期是不稳定的，有的细胞丢失部分染色体，可能丧失产生抗体的能力。
1、脾细胞制备： 1．引颈处死小鼠，用酒精消毒表体。2．无菌条件下取出脾脏，剃除结缔组织和脂肪，用 5ml 无血清培养液冲洗一次。3．把脾脏置于已消毒的 90~100 目不锈钢网或尼龙纱网中。
2、然后，将两者放在特定的培养基里面，在PEG（聚乙二醇）之类的物质作用下进行细胞融合。 然后是，第一次筛选，选的是骨髓瘤与效应B细胞的杂交瘤细胞，也就是单克隆抗体。
3、将两个细胞（例如 B淋巴细胞和骨髓瘤细胞）通过诱导融合形成杂交细胞，具体操作时为了提高成功率会用多个细胞同时杂交，然后筛选出目的细胞，再进行细胞培养使其有丝分裂而增值，得到大量目的细胞（杂交瘤细胞）。
4、(一)细胞的选择与融合建立杂交瘤技术的目的是制备对抗原特异的单克隆抗体，所以融合细胞一方必须选择经过抗原免疫的B细胞，通常来源于免疫动物的脾细胞。
5、缺点就是生成的抗体只针对1种抗原决定簇，比较单一。基本过程：抗原的处理在小鼠体内植入抗原（免疫）取免疫鼠的B淋巴细胞与鼠的骨髓瘤细胞用PEG细胞融合在多孔板上筛选。
6、进行体内或体外培养。体内培养就是将杂交瘤细胞注入实验动物腹腔，将来从腹水中提取。
1、体内培养杂交瘤细胞提取单克隆抗体是从腹水中提取的，小鼠会有腹水就是因为杂交细胞过度繁殖，最后小鼠也会因此而死。这个过程小鼠会很痛苦，所以一般实验室不会支持这个实验。
2、因为体内培养可以减弱不利外界环境因素对杂交瘤细胞增值和表达单抗的影响，可以为杂交瘤细胞生存提供一个相对较稳的生存环境。
3、因为体内培养可以减弱不利外界环境因素。根据查询相关公开信息显示：体内培养可以减弱不利外界环境因素对杂交瘤细胞增值和表达单抗的影响，为杂交瘤细胞生存提供一个相对较稳的生存环境。
4、用特定的选择性培养基筛选出能够无限增殖并产生特异性抗体的杂交瘤细胞 进行体内或体外培养。体内培养就是将杂交瘤细胞注入实验动物腹腔，将来从腹水中提取。
5、简单描述就是：将两个细胞（例如 B淋巴细胞和骨髓瘤细胞）通过诱导融合形成杂交细胞，具体操作时为了提高成功率会用多个细胞同时杂交，然后筛选出目的细胞，再进行细胞培养使其有丝分裂而增值，得到大量目的细胞（杂交瘤细胞）。
就高中的知识来说。所有的动物细胞培养（包括杂交瘤细胞）的培养都需要动物血清。
杂交瘤细胞的体外培养用的是液体培养基，不需加琼脂，这是一点不同.另外从培养基的化学成分角度来分析。植物组织培养培养基的成分主要是矿质元素、蔗糖（碳源）、植物激素、维生素、有机添加物。
固体培养基是在液体培养基中加入1．5%--2%的琼脂，半固体培养基是加入0．2%～0．5%的琼脂。琼脂又称琼胶或洋菜，是由海藻加工而成，其化学性质稳定一般微生物均不能分解利用。
第一次筛选的原理与方法：细胞融合后，杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键。普遍采用的HAT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）和胸腺嘧啶核苷酸（T）。
一次用一个小包装， 避免反复冻融 。特殊的添加因子 特殊的添加因子可以使细胞培养的条件得到优化。原代培养细胞接种密度需适当提高，应尽可能用营养丰富的培养液，如使用胎牛血清。这些都属于一般优化条件。
杂交瘤细胞是可以无线增值的细胞；杂交细胞是细胞融合后，两个或多个细胞融合形成的单核细胞。
杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠细胞作小鼠骨髓瘤细胞。
AB，AA，BB 。因为A，B两种细胞随机融合（A，B细胞各有若干个），所以会产生AA.BB，AB三种C细胞。
B细胞的基因经由杂交瘤细胞的特性得以永生和繁殖，但是这个B细胞是针对那个表位产生的抗体基因，在经过鉴定之前，你是不知道的。
